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在蛋白純化和融化過(guò)程中，特別是包涵體蛋白，變性劑（denaturant）提供了最有效的手段，其獲得的純化蛋白屬于變性蛋白（denatured protein）。為了使變性蛋白恢復(fù)為天然蛋白（native protein），即具有蛋白質(zhì)的自然結(jié)構(gòu)和活性，需要進(jìn)行蛋白復(fù)性（renaturation）或重新折疊（refolding）。蛋白復(fù)性是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，諸如pH、離子強(qiáng)度、低分子添加劑、氧化還原電位（redox potential）和溫度等物化因子，影響體外蛋白復(fù)性的效率。通常體外復(fù)性的方法包括稀釋法和緩沖交換法。前者通過(guò)化學(xué)處理，而后者采用物理方法（例如透析、膜過(guò)濾（diafiltration）、凝膠過(guò)濾層析（gel-filtration chromatography）等，以達(dá)到蛋白復(fù)性的效果。物理透析具有自然復(fù)性，減少化學(xué)干擾。
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
HEPENGBIO透析液（Reagent A）        毫升
HEPENGBIO透析袋  個(gè)
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)           1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里， 避免光照，有效保證3月
 
用戶(hù)自備
 
2升燒杯：用于樣品保存的容器
4℃冰箱：用于反應(yīng)孵育
 
實(shí)驗(yàn)步驟
 
1． 準(zhǔn)備好可溶性純化變性蛋白樣品
2． （選擇步驟）加入適量的HEPENGBIO透析液（Reagent A）調(diào)整蛋白濃度到1毫克/毫升
3． 移取xx毫升蛋白樣品到HEPENGBIO透析袋或自備透析袋（注意：確保封閉，沒(méi)有滲漏）
4． 放入2升燒杯中
5． 加入xx毫升HEPENGBIO透析液（Reagent A）
6． 放進(jìn)4℃環(huán)境中，磁力攪拌16小時(shí)（注意：4小時(shí)后可以更換一次透析液）
7． 收集樣品（注意：用戶(hù)可以使用新鮮的HEPENGBIO透析液（Reagent A）或自備蛋白稀釋液進(jìn)行稀釋處理）
8． （選擇步驟）移取100微升進(jìn)行生物檢測(cè)，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)等確定復(fù)性蛋白活性值
9． 即刻放進(jìn)－70℃冰箱里保存